Agarozes gela sagatavošana elektroforēzei

Agarozes gela sagatavošana elektroforēzei

Piezīme: Vienmēr valkājiet vienreizējās lietošanas cimdus!

Soli pa solim instrukcijas

Agarozes pulvera svēršana:uskatiet svēršanas papīru un elektroniskos svarus, lai izmērītu 0,3 g agarozes pulvera (pamatojoties uz 30 ml sistēmu).

TBST bufera sagatavošana:ppagatavojiet 30 ml 1x TBST buferšķīduma 100 ml Erlenmeijera kolbā.

Agarozes pulvera izšķīdināšana:pievietojiet agarozes pulveri TBST buferšķīdumā un labi sakratiet.Ielieciet tosmikroviļņu krāsnī un karsē (parasti 50 sekundes, pārklājot ar alumīnija foliju), līdz tas pilnībā izšķīst.

Atdzesēšana un nukleāzes pievienošana:uizmantojiet cimdus, lai maisījumu izņemtu no mikroviļņu krāsns un ļaujiet tam nedaudz atdzist aukstā ūdenī, līdz tas ir silts (apmēram 60°C). Pievienojiet 2 µl nukleāzes (Eb aizstājēju), vienlaikus kratot, lai rūpīgi sajauktu.

Gēla veidnes sagatavošana:

• Cnolieciet un nosusinietgēla paplāte un gēla liešanas ierīceno elektroforēzes tvertnes.
•  Pmežģīnes želejupaplāteiekšējā tvertnē un ievietojiet ķemmi fiksētā pozīcijā.
• Sajauciet agarozes gēla šķīdumu, kas atdzesēts līdz aptuveni 65°C, un uzmanīgi ielejiet to uzgēla paplātesadaļāgēla liešanas ierīce, lēnām izkliedējot, līdz tas veido vienmērīgu želejas slāni uz stikla plāksnes.
• Ļaujiet tai nostāvēties istabas temperatūrā, līdz želeja pilnībā sacietē.
• Uzmanīgi noņemiet ķemmi vertikāli un noņemiet lenti.
• Novietojiet želejupaplāteelektroforēzes tvertnē.

Svarīgi: Pārliecinieties, ka ķemmes zobu zonā nav gaisa burbuļu. Šķidruma virsmai jābūt gludai bez viļņošanās.

Gēla palaišana

Notiek želejas ielāde

Pēc gēla sacietēšanas ievietojiet to elektroforēzes tvertnē un ielejiet elektroforēzes buferšķīdumu, līdz gēls ir iegremdēts.

Paraugu sagatavošana

• Izņemiet no ledusskapja marķieri un iekraušanas buferi.
• Pievienojiet paraugiem 6 µl ielādes buferšķīduma un labi samaisiet.
• Izmantojot mikropipeti, lēnām ievietojiet paraugus lielajās gela iedobēs (uzmanieties, lai necaurdurtu želeju, un neizdaliet visu tilpumu, lai izvairītos no gaisa burbuļiem).
• Ievietojiet marķieri jebkurā no mazajām iedobēm (atcerieties tā pozīciju).

Elektroforēzes sākšana

• Nosedziet elektroforēzes tvertni un sāciet elektroforēzi uzreiz pēc gēla ievietošanas.
• Iestatiet spriegumu uz 60-100 V. Paraugi migrēs no negatīvā elektroda (melnā) uz pozitīvo elektrodu (sarkano).
• Augstāks spriegums saīsina agarozes gela efektīvo atdalīšanas diapazonu.
• Pārtrauciet elektroforēzi, kad bromfenolzilā krāsviela sasniedz aptuveni 1 cm no gēla plāksnes apakšējās malas.

Rezultātu novērošana

Pēc joslu atdalīšanas pārtrauciet elektroforēzi, izņemiet želeju un tieši atklājiet un nofotografējiet to.

Izmantojiet gēla attēlveidošanas sistēmu, lai fotografētu un novērotu joslas (pārbaudiet, vai marķierim vai paraugiem nav joslu).

Pēc gēla joslas kartes iegūšanas atrodiet marķieri. Pamatojoties uz marķieri, jūs varat noteikt mērķa joslas!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ir ražojis elektroforēzes produktus vairāk nekā 50 gadus. Šeit mēs piedāvājam mūsu horizontālās elektroforēzes sistēmasagarozes želejaelektroforēze.Izvēlietieshorizontālās elektroforēzes sistēmasno Pekinas liuyi par jūsu gēla elektroforēzes eksperimentu, lai palīdzētu jūsu pētījumiem biotehnoloģiju nozarē.

Piedāvājam dažādu modeļu horizontālās elektroforēzes tvertnes liešanai un darbināšanaiagarozeželejas par lieluagarozeželejas

Horizontālās iegremdētās gēla elektroforēzes ierīces izvēles rokasgrāmata

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) ir specializējies elektroforēzes instrumentu ražošanā vairāk nekā 50 gadus ar mūsu pašu profesionālo tehnisko komandu un pētniecības un attīstības centru. Mums ir uzticama un pilnīga ražošanas līnija no projektēšanas līdz pārbaudei un noliktava, kā arī mārketinga atbalsts. Mūsu galvenie produkti ir elektroforēzes šūna (tvertne/kamera), elektroforēzes barošanas avots, zils gaismas diodes caurgaismotājs, UV transiluminators, gēla attēlu un analīzes sistēma utt. Mēs piegādājam arī laboratorijas instrumentus, piemēram, PCR instrumentu, virpuļmaisītāju un centrifūgu laboratorijai.

Ja jums ir kāds mūsu produktu iegādes plāns, lūdzu, nevilcinieties sazināties ar mums. Jūs varat nosūtīt mums ziņojumu uz e-pastu[aizsargāts ar e-pastu]vai[aizsargāts ar e-pastu], vai, lūdzu, zvaniet mums pa tālruni +86 15810650221 vai pievienojiet Whatsapp +86 15810650221, vai Wechat: 15810650221.

Lūdzu, skenējiet QR kodu, lai pievienotu vietnei Whatsapp vai WeChat.