DNS gēla elektroforēze ir izplatīta molekulārās bioloģijas metode, ko izmanto DNS fragmentu atdalīšanai un analīzei, pamatojoties uz to izmēriem. Process ietver dažāda izmēra DNS fragmentu ielādi uz gēla, kas izgatavots no agarozes, ogļhidrāta, kas atrodams sarkanajās aļģēs.
Agarozes želejas sagatavošana un liešana
- Izšķīdiniet agarozi atbilstošā daudzumā elektroforēzes buferšķīduma. Gela koncentrāciju nosaka pēc masas un tilpuma attiecības, piemēram, 1 g agarozes uz 100ml buferšķīduma 1% gelam.
- Sildiet maisījumu mikroviļņu krāsnī, grozot trauku, lai nodrošinātu pilnīgu agarozes izšķīšanu.
- Gēla šķīdumam pievieno etīdija bromīdu līdz galīgajai koncentrācijai 0,5mg/ ml. Etīdija bromīds interkalējas starp blakus esošajiem DNS bāzes pāriem un UV gaismā izstaro oranžu fluorescenci. Ņemiet vērā, ka etīdija bromīds ir kancerogēns, tāpēc, rīkojoties ar to, ir nepieciešami atbilstoši drošības pasākumi, piemēram, cimdu nēsāšana.
- Atdzesējiet gēla šķīdumu ūdens vannā, lai novērstu gēla paplātes deformāciju augstās temperatūras dēļ.
- Ievietojiet ķemmi gēla šķīdumā, lai izveidotu parauga iedobes. Izvēlieties ķemmes, kas piemērotas ielādējamā DNS parauga daudzumam. Ielejiet agarozes gēla šķīdumugēla paplāteun ļauj tai sastingt istabas temperatūrā.
- Kad želeja ir sacietējusi, noņemiet ķemmi. Ja neizmantosiet želeju nekavējoties, ietiniet to plastmasas apvalkā un uzglabājiet 4 ℃ temperatūrā, līdz tas ir nepieciešams.
Gēla sagatavošana un iedarbināšana
Pirms elektroforēzes sākšanas sajauciet DNS paraugu ar ielādes buferšķīdumu. Iekraušanas buferis parasti ir sešas reizes koncentrētāks un palīdz paraugam nogrimt iedobes apakšā un izsekot kustībai elektroforēzes laikā.
Iestatiet strāvas padevi uz norādīto spriegumu.
Gēla tvertnei pievienojiet pietiekami daudz elektroforēzes bufera, lai nosegtu gēla virsmu.Nodrošinātpareizos elektrodu savienojumus.
Ievietojiet DNS paraugu un molekulmasas marķierus gēla iedobēs.
Ieslēdziet strāvas padevi, lai sāktu elektroforēzi.
Atdalīto DNS fragmentu novērošana
Pēc elektroforēzes izslēdziet strāvas padevi un noņemiet želeju.
Izmantojiet UV gaismas avotu, lai apgaismotu želeju; DNS fragmenti parādīsies kā oranžas fluorescējošas joslas.
Dokumentējiet gēla attēlu, lai analizētu atdalītos DNS fragmentus.
Pēc eksperimenta nodrošiniet pareizu gela un elektroforēzes bufera iznīcināšanu, ievērojot laboratorijas norādījumus. Vienmēr valkājiet cimdus, strādājot ar gēliem un buferiem, kas satur etīdija bromīdu, lai pasargātu no šīs bīstamās vielas iedarbības.
DNS gēla elektroforēzi plaši izmanto molekulārās bioloģijas un ģenētikas pētījumos, lai noteiktu DNS molekulu izmērus, atdalītu DNS fragmentus, noteiktu gēnu mutācijas un DNS pirkstu nospiedumus, cita starpā. Tā ir vienkārša un efektīva eksperimentāla metode, kas palīdz izprast DNS paraugu sastāvu un īpašības.
Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, profesionāls ražotājs, kas vairāk nekā 50 gadus koncentrējas uz elektroforēzes produktiem, piedāvā virkni elektroforēzes tvertņu (kameras/šūnas) gēla elektroforēzei, piemēram, horizontālās elektroforēzes tvertnes (kameras/šūnas)DNSgēla elektroforēze un vertikālās elektroforēzes tvertnes (kameras/šūnas) proteīna gēla elektroforēzei. Tajā pašā laikā tas nodrošina arī dažāda veida elektroforēzes barošanas avotus, korpusa tumšās kastes analizatoru un UV transiluminatoru. Varat izvēlēties Beijing Liuyi elektroforēzes tvertnes (kameras/šūnas), lai izmērītu RNS molekulmasu un atdalītu dažāda lieluma RNS savai laboratorijai.
Šeit mēs to darīsimieteiktviena veida horizontālās elektroforēzes tvertnes (kameras/šūnas) modelisDYCP-31DN lai pagatavotu un palaistu želeju.
Pēc gēla palaišanas varat izmantot mūsu gēla attēla un analīzes sistēmas modeliWD-9413Bnovērot, analizēt un fotografēt gēlam. Liuyi Biotech piedāvā arī UV transiluminatoru (UV analizatoru), lai novērotu želeju. Mums ir melnās kastes tipa UV transiluminatora (UV Analyzer) modelisWD-9403A,9403C,WD-9403F, portatīvais UV transiluminatora (UV Analyzer) modelisWD-9403Bun rokas UV transiluminators (UV analizators)WD-9403Elai jūs izvēlētos.
Beijing Liuyi zīmolam Ķīnā ir vairāk nekā 50 gadu vēsture, un uzņēmums var nodrošināt stabilus un augstas kvalitātes produktus visā pasaulē. Gadu attīstības gaitā tas ir jūsu izvēles cienīgs!
Tagad mēs meklējam partnerus, tiek gaidīti gan OEM elektroforēzes tvertnes, gan izplatītāji.
Ja jums ir kāds mūsu produktu iegādes plāns, lūdzu, nevilcinieties sazināties ar mums. Jūs varat nosūtīt mums ziņojumu uz e-pastu[aizsargāts ar e-pastu]vai[aizsargāts ar e-pastu], vai, lūdzu, zvaniet mums pa tālruni +86 15810650221 vai pievienojiet Whatsapp +86 15810650221, vai Wechat: 15810650221.
Publicēšanas laiks: 08.08.2023